active rac-武漢紐斯特生物技術(shù)

arl1激l活試驗(yàn)。純化的gst標(biāo)記的arl1蛋白用抗活性arl1單克l隆抗l體（cat。#26924）用gdp（車道1）或gtpγs（車道2）處理后，用抗arl1單克l隆抗l體（cat）進(jìn)行印跡。#26056年）。顯示arl1蛋白輸入控制在底部面板中。

產(chǎn)品描述

arf樣蛋白1（arl1）是調(diào)節(jié)性gtpase家族中的一員，位于ras中gtpases的超家族，在真核生物中具有高度保守的同源基因。arl1-用于果蠅和秀麗隱桿線蟲的早期胚胎發(fā)育。arl1在一級(jí)序列，細(xì)胞位置和功能（膜交通的調(diào)節(jié)）到arf1–6甚至共享幾個(gè)共同的有約束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高爾基/跨高爾基網(wǎng)絡(luò)，有-表明arl1可能在離子穩(wěn)態(tài)中起作用酵母。

目前還沒有直接測(cè)定arl1-gtpase活性的方法。neweast biosciences arl1激l活檢測(cè)試劑盒是基于特定構(gòu)型的單克l隆抗l體特-識(shí)別arl1 gtp，但不識(shí)別arl1 gdp的抗l體。鑒于單克l隆抗l體對(duì)其抗原，活化試驗(yàn)可在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。這個(gè)分析結(jié)果-，重現(xiàn)性一致。

電泳和轉(zhuǎn)移

1向聚丙l烯-凝膠（17%）中加入15μl/孔的下拉上清液。而且建議包括預(yù)染色mw標(biāo)準(zhǔn)（作為成功轉(zhuǎn)入的指標(biāo)步驟3）。

2按照制造商的說明進(jìn)行sds-page。

3按照制造商的說明，將凝膠蛋白轉(zhuǎn)移到pvdf或硝化纖維膜上說明。

免l疫印跡檢測(cè)（所有步驟均在室溫下攪拌）

1在電印跡步驟之后，將pvdf膜浸入100%甲l醇中15次

然后在室溫下干燥5分鐘。

如果使用-纖維素，則應(yīng)跳過此步驟。

2室溫下用5%脫脂奶粉或3%牛血l清白蛋白在tbst中封閉1小時(shí)

不斷地?cái)噭?dòng)。

用抗arl1單克l隆抗l體孵育，新鮮稀釋1:50~1000

（取決于樣品中arl1蛋白質(zhì)的含量）5%脫脂奶粉或3%

bsa/tbst，室溫下持續(xù)攪拌1-2小時(shí)或4o

過夜。

3用tbst清洗吸水膜三次，每次5分鐘。

4用二級(jí)抗l體（例如山羊抗鼠igg，hrp結(jié)合物）培養(yǎng)膜，

在室溫下，在5%脫脂奶粉或3%bsa/tbst中新鮮稀釋1:1000，1小時(shí)

不斷地?cái)噭?dòng)。

5用tbst清洗吸水膜三次，每次5分鐘。

6使用您選擇的檢測(cè)方法，如ecl。