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arl1激l活試驗。純化的gst標(biāo)記的arl1蛋白用
產(chǎn)品描述
arf樣蛋白1(arl1)是調(diào)節(jié)性gtpase家族中的一員,位于ras中
目前還沒有直接測定arl1-gtpase活性的方法。
小g蛋白是從屬于細(xì)胞調(diào)節(jié)因子中的一個超家族。rho家族是小g蛋白中的一個亞家族,它在細(xì)胞運動、細(xì)胞分裂以及基因轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮主要作用。而本試劑盒中的cdc42就屬于rho亞家族中的一種, cdc42參與生理活動過程中其分子結(jié)構(gòu)會呈現(xiàn)出2種相互轉(zhuǎn)換的形式:與gtp結(jié)合的激l活狀態(tài)和與gdp結(jié)合的非活性狀態(tài)。
目前cdc42蛋白活性的檢測主要是依據(jù)小gtp酶cdc42可以與p21活化激酶(pak)的p21結(jié)合區(qū)域(pbd)結(jié)合,使pak活化從而發(fā)揮生物學(xué)功能,進(jìn)而間接的進(jìn)行cdc42活性l功能的監(jiān)測。然而此方法在檢測過程中存在著一定的局限性比如gtp水解成gdp的速度過快以及cdc42-gtp結(jié)合蛋白與p21結(jié)合區(qū)域之間較低的親和力,導(dǎo)致這種檢測方法的重復(fù)性較差。
分析原理
neweast biosciences arl1激l活檢測試劑盒基于配置特-抗arl1-gtp
需要但未提供的材料
1-性和非-性細(xì)胞裂解物
2蛋白酶抑制素
4°c搖管器或振動篩
40.5 m edta,ph8.0
51百萬氯-
62x還原sds-page樣品緩沖液
7電泳和免l疫印跡系統(tǒng)
8免l疫印跡洗滌緩沖液,如tbst(10 mm tris hcl,ph 7.4,0.15 m nacl,0.05%
吐溫-20)
9免l疫印跡阻斷緩沖液(含5%脫脂奶粉或3%牛血l清白蛋白的tbst)
10pvdf或硝化纖維膜
11次級抗l體
12ecl檢測試劑
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