小鼠小chang粘膜上皮細(xì)胞

上海晶抗生物工程有限公司為您提供小鼠小chang粘膜上皮細(xì)胞。

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細(xì)胞名稱: 小鼠小chang粘膜上皮細(xì)胞


種屬來源: 小鼠


組織來源: 實(shí)驗(yàn)動物的正常小chang組織


特    征: 正常原代細(xì)胞


細(xì)胞形態(tài): 鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞


生長特性: 貼壁生長


培 養(yǎng) 基: 我們使用elitecell原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系作為體外培養(yǎng)原代肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)基。


生長條件: 氣相：空氣，95%；-，5%; 溫度：37 ℃,


傳代方法: 1：2至1：6，每周2次。


凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% dmso，液氮儲存


細(xì)胞鑒定: 細(xì)胞角蛋白-19（ck-19）免疫熒光染色為陽性，經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。


qc檢 測: 不含有 hiv-1、 hbv、hcv、支原體、-、酵母和-。




特點(diǎn)和簡介
小chang位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大chang相連。小chang與心互為表里。是食物-吸收的主要場所，盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲chang，全長約5－6米，張開有半個(gè)籃球大，分為十二指chang、空chang和回chang三部分。其管壁由黏膜，黏膜下層，肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞，黏膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的chang腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和chang腺與小chang的-和吸收功能關(guān)系密切。


接受后處理
1) 收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。


2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將t25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。


3) 棄去t25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。


4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。


5) 接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或-污染，請及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。


培養(yǎng)操作
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1ml 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4ml 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2ml 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。


2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 pbs 潤洗細(xì)胞 1-2 次。


2. 加 1ml -液（0.25%trypsin-0.53mm edta）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中- 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞-情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。


3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2ml 培養(yǎng)液后吹勻。


4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)-時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 t25 瓶為類；


1. 小鼠小chang粘膜上皮細(xì)胞 凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止-，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。


2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 dmso，輕輕混勻，dmso 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。


3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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