小鼠小chang---細胞

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細胞名稱: 小鼠小chang-細胞


種屬來源: 小鼠


組織來源: 實驗動物的正常小chang組織


特    征: 正常原代細胞


細胞形態(tài): 長梭形狀細胞，不規(guī)則細胞


生長特性: 貼壁生長


培 養(yǎng) 基: 我們使用elitecell原代上皮細胞培養(yǎng)體系作為體外培養(yǎng)原代肝內膽管上皮細胞的培養(yǎng)基。


生長條件: 氣相：空氣，95%；-，5%; 溫度：37 ℃,


傳代方法: 1：2至1：6，每周2次。


凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% dmso，液氮儲存


細胞鑒定: -肌動蛋白（α-sma）免疫熒光染色為陽性，經鑒定細胞純度高于90%。


qc檢 測: 不含有 hiv-1、 hbv、hcv、支原體、-、酵母和-。




特點和簡介
小chang位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大chang相連。小chang與心互為表里。是食物-吸收的主要場所，盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲chang，全長約5－6米，張開有半個籃球大，分為十二指chang、空chang和回chang三部分。其管壁由黏膜，黏膜下層，肌層和漿膜構成。小chang-肉瘤是起源于小chang壁肌層、黏膜下肌層和chang壁血管-的惡性zhong瘤，是小chang結締組織惡性zhong瘤中常見的一種。因此，體外小chang-細胞的培養(yǎng)對研究小chang-肉瘤提供了基礎和前提。


接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。


2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將t25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。


3) 棄去t25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。


4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。


5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發(fā)現污染或-污染，請及時與我們取得聯系。


培養(yǎng)操作
1）復蘇細胞：將含有 1ml 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4ml 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000rpm 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2ml 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。


2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。


1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 pbs 潤洗細胞 1-2 次。


2. 加 1ml -液（0.25%trypsin-0.53mm edta）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中- 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞-情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。


3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000rpm 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2ml 培養(yǎng)液后吹勻。


4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)-時，可進行細胞凍存。下面 t25 瓶為類；


1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止-，可使用血球計數板計數。


2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 dmso，輕輕混勻，dmso 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。


3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

     本公司主營： ELISA試劑盒 - 試劑盒 - 檢測試劑盒 - 酶聯免疫試劑盒 - ELISA Kit
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