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he染色流程是什么,很多人都不知道,今天跟著小編一起來學習一下,切片的好壞直接影響-診斷的及時與準確性。因此一張高的he染色切片,是實驗室必須掌握的技術之一。he染色目前在國內國外病理診斷上被
廣泛采用,常規(guī)的染色方法。下面一起來看he染色的基本順序。一般切片的片子應在60-70度左右的烤箱中烘烤30分鐘以才可以進行染色?偟膩碚f是一個時間較長的過程。
1.樣品制備
對于貼壁生長細胞,胰酶-,調整細胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應時間后,取出細胞爬片,用pbs 洗滌3次。2.樣品固定 95%-固定20min,pbs洗滌2次,每次1min。3.染核 蘇mu
素染液染色2-3min,自來水洗滌。4.分色 鏡下觀察,若細胞核染色過深,用1%-酒精溶液分色數(shù)秒,自來水洗滌。 5.染胞質 浸入伊紅染液染色1min,樺木木質部切片,自來水洗滌。6.封片 吹干或自然晾gan細胞爬片后,中性樹膠封片。
以上六點就是he染色的基本步驟,大家可以參考一下哦
常見的生物切片,厚度一般在幾微米的程度,這種厚度制作起來比較簡單,除了可以使用自動化的設備來切片之外,手動操作也能切到這種厚度,而且完夠滿足光學顯微鏡下觀察的標準。不過在的科研領域里,需要觀察更細微的細胞結構,甚至需要從分子的層面來進行研究,這時候就需要用到電子顯微鏡。然而電子顯微鏡也需要更薄的樣品,切片至少要達到0.1微米的厚度,而這種切片也就被稱為是超薄切片,在很多實驗研究里需要厚度達到50納米,顯然手i操作是無法達到這種厚度的。那么在實驗環(huán)境下是怎樣做成這種超薄生物切片的呢?首先是需要進行-的固定,因為在如此薄的尺度之下,不但基本的細胞結構都已經被完全破壞,而且其中的細胞器也都被切開,里面的生物酶會釋放出來,并且在很短的時間內使細胞結構遭到破壞。所以就需要在取得樣品之后盡快進行固定,要求在一-分鐘之 內完成這項操作,然后再使用對應的材料來做透明化以及包埋,接下來還需要配合的切片機來完成切片的過程,從而達到理想的厚度。
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