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共價偶聯(lián)比物理吸附更-一些,主要表現(xiàn)在它克服了物理吸附的兩個缺點:共價偶聯(lián)在固體表面的抗體(1)排列取向一定程度上是確定的;(2)不容易脫離到溶液中。賴氨酸、谷氨酸和天冬氨酸等-酸經(jīng)常被作為蛋白質(zhì)修飾的靶點,其中賴氨酸尤甚(chem. sci., 2017,8, 63-77,chem. sci., 2018,微陣列芯片制作, 9, 79–87),其它-酸由于位于蛋白質(zhì)內(nèi)部或反應(yīng)性弱或不可控等原因而很少用于偶聯(lián)。
以合成寡核苷酸探針為例,該技術(shù)主要步驟為:首先使支持物-化,并用光敏保護基團將其保護起來。每次選取擇適當?shù)谋喂饽ぃ?mask )使需要聚合的部位透光,其它部們不透光。這樣,光通過蔽光膜照射到支持物上,受光部位的-解保護。因為合成所用的單體分子一端按傳統(tǒng)固相合成方法活化,另一端受光敏保護基的保護,所以發(fā)生偶聯(lián)的部位反應(yīng)后仍舊帶有光敏保護基團。因此,每次通過控制蔽光膜的圖案(透光與不透光)決定哪些區(qū)域應(yīng)被活化,以及所用單體的種類和反應(yīng)次序就可以實現(xiàn)在待定位點合成大量預(yù)定序列寡聚體的目的。
它是在基因探針的基礎(chǔ)上研制出的,所謂基因探針只是一段人工合成的堿基序列,在探針上連接一些基因芯片
可檢測的物質(zhì),根據(jù)堿基互補的原理,微陣列芯片種類,利用基因探針到基因混合物中識別特定基因。它將大量探針分子固定于支持物上,然后與標記的樣品進行雜交,微陣列芯片,通過檢測雜交信號的強度及分布來進行分析;蛐酒ㄟ^應(yīng)用平面微細加工技術(shù)和超分子自組裝技術(shù),把大量分子檢測單元集成在一個微小的固體基片表面,可同時對大量的-和蛋白質(zhì)等生物分子實現(xiàn)、快速、低成本的檢測和分析。
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