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使用廣泛的-和羧基偶聯(lián)劑就要數(shù)edc和nhs(sulfo-nhs)了。大多數(shù)情況下,同時使用edc/nhs的交聯(lián)于只使用edc的,nhs的使用能夠-增強(qiáng)偶聯(lián)效率。但也有個例,微陣列芯片制作,比如2012年的一篇工作(diagnostics (basel). 2012 aug 27;2(3):23-33.),他們在apets修飾的金芯片和96孔板表面組裝一抗,發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用edc比同時使用edc/nhs和edc/sulfo-nhs都。
感受完這種粗糙度之后,2010年就有人把疏水蛋白引入到檢測中,江蘇微陣列芯片,-這種基質(zhì)表面抗體堆積不均勻的情況。疏水蛋白能夠自組裝形成10nm厚的兩親性膜,疏水性一側(cè)貼在疏水性的聚板上,親水性的一側(cè)伸向溶液中,可以物理吸附抗體,用于組裝一抗。石英晶體微天平結(jié)果顯示在ph=5時,聚板上形成一層致密的膜;x射線光電子能譜和水接觸角測試顯示疏水蛋白修飾后,疏水的聚板能夠保持長達(dá)3個月的親水性;原子力顯微鏡結(jié)果顯示,連接到疏水蛋白上的抗體也終于站起來了,是一種“end-on”的取向排列。
2)用點(diǎn)樣法固定在玻璃板上的dna探針陣列,通過與熒光標(biāo)記的靶基因雜交進(jìn)行檢測。這種方法點(diǎn)陣密度可有較大的提高,各個探針在表面上的結(jié)合量也比較一致,但在標(biāo)準(zhǔn)化和批量化生產(chǎn)方面仍有不易克服的困難。3)在玻璃等硬質(zhì)表面上直接合成的寡核苷酸探針陣列,微陣列芯片服務(wù),與熒光標(biāo)記的靶基因雜交進(jìn)行檢測。該方法把微電子光刻技術(shù)與dna化學(xué)合成技術(shù)相結(jié)合,可以使基因芯片的探針密度-提高,減少試劑的用量,實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化和批量化-生產(chǎn),有著十分重要的發(fā)展?jié)摿Α?/p>
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