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camp濃度為16.0pmol/ml的樣品,用0.1m hcl進行連續(xù)七次1:2梯度稀釋。將實際的camp濃度和測定的camp濃度繪制圖表。該直線的斜率為1.000,相關系數(shù)為0.999。
交叉反應
部分相關化合物的交叉反應由競爭elisa測定。將可能的交叉反應物溶解到試劑盒分析緩沖液中,濃度從500pmol/ml至500,c- elisakit,000pmol/ml。這些樣品通過-化在camp競爭分析中被測定,通過比較樣品中交叉試劑的實際濃度,可以計算出交叉反應,并用百分比(%)表示。
武漢紐斯特生物科技有限公司(wuhanneweastbiotechonologyco.ltd),系美國生命科學試劑供應商美國neweastbio在的子公司。公司位于武漢東湖-開發(fā)區(qū)光谷生物城.美國neweastbio-于生命科學和生物技術領域,主要產(chǎn)品有小分子、elisa試劑盒、蛋白等,與高校和研究所、大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關系,產(chǎn)品銷往。
非-化c-標準品將5000 pmol/ml c-標準品溶液平衡至室溫。從#1至#7標記六只潔凈試管。移取475μl 0.1m hcl到#1號試管,400μl到#2至#7號試管。加入25μl 5000 pmol/ml c-標準品到#1管中,劇烈渦旋震蕩。從#1管中取出100μl溶液至#2管中,渦旋震蕩。以此類推,重復上步操作,梯度稀釋至#7管。
經(jīng)以上操作,#1至#6管中c-標準品濃度分別為250,50,10,2,0.4,0.08和0.016 pmol/ml(詳見c-加樣表)。稀釋過的標準品需在30分鐘內使用。
標記一只試管作為無標準品空白對照(nsb)。移取600μl 0.1m hcl到nsb管中。
洗滌液將15 ml 10×洗滌液儲液加到135 ml去離子水中,稀釋成工作液。稀釋液可在室溫保存至試劑盒有效期限,或者3個月。
試劑盒組成材料和試劑
1. 羊抗小鼠igg包被的96孔微孔板一張 catalog no.30101
該微孔板將特-識別小鼠igg 的山羊抗l體包被于可拆分酶標條上。
2. camp偶聯(lián)的辣根-化物酶工作液6 ml catalog no. 30102
本包裝含1000×偶聯(lián)酶儲存液和稀釋緩沖液。
3. 抗camp的小鼠單克l隆抗l體工作液6 ml catalog no. 26002-2
本包裝含1000×抗l體儲存液和稀釋緩沖液。
注意:為了穩(wěn)定和長效的實驗,抗l體儲存于-80℃。在使用前將6μl 1000×偶聯(lián)酶儲存液加入到6 ml 稀釋緩沖液中配制為工作液,并輕輕混勻。工作液請避免反復凍融。
4. 中和液6 ml catalog no. 30103
5. 10×濃縮洗滌液15 ml catalog no. 30103
含去污劑的磷酸鹽緩沖液。
6. camp標準品0.25 ml catalog no. 30203
濃度5000 pmol/ ml
7. 顯色底物a,12 ml catalog no. 30107
8. 顯色底物b, 12 ml。 catalog no. 30108
9. 終止液,6 ml; catalog no. 30110
注意:該溶液有腐蝕性;儲存時請旋緊瓶蓋
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