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在和醫(yī)
小粒徑無孔單分散層析介質(zhì)用于-的分離純化
傳統(tǒng)的層析介質(zhì)填料都是多孔的微球,因?yàn)槎嗫孜⑶虿牧系谋缺砻娣e大,因而可以對(duì)一般生物分子分離提供較高的吸附載量。層析介質(zhì)的孔徑一般都小于2000?(通常都小于100納米)。而很多-顆粒的粒徑一般都大于20納米,有的甚至都超過100納米。由于體積排阻的原因,-顆粒無法擴(kuò)散進(jìn)入層析介質(zhì)的孔內(nèi),因而在層析吸附-顆粒時(shí)只有介質(zhì)微球的外表面可以利用,protein a 介質(zhì),孔內(nèi)表面積由于體積排阻的原因而無法吸附-顆粒。然而,-樣品中的雜質(zhì)分子一般都比-小,因而可以擴(kuò)散進(jìn)入層析介質(zhì)孔內(nèi)被吸附在里面。由于傳統(tǒng)層析介質(zhì)孔內(nèi)表面積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于介質(zhì)微球外表面積,雜質(zhì)吸附往往由于孔內(nèi)表面積的存在而非常-,吸附洗脫時(shí)雜質(zhì)含量因而較高,-顆粒純化效果往往不理想。無孔層析介質(zhì)由于沒有大量只能容納雜質(zhì)進(jìn)入而-顆粒無法擴(kuò)散進(jìn)入的內(nèi)孔,層析介質(zhì),-顆粒在介質(zhì)外表面的層析吸附量雖然不會(huì)有明顯變化,但樣品中的雜質(zhì)被層析吸附的量會(huì)-減少。因此經(jīng)無孔層析填料層析洗脫后,-樣品的分離純度-提高。
用于傳統(tǒng)小分子的分離方法如重結(jié)晶、精餾等對(duì)生物分子具有破壞性,因此基本上不能用于生物大分子分離純化,使得生物大分子的分離面臨-挑戰(zhàn)。層析技術(shù)具有-的分離純化效率,且條件溫和,連續(xù)流層析,在分離純化過程中容易保持生物分子的活性,因此層析技術(shù)已成為生物分離的主要的工具。層析分離過程是把混合樣品從裝有層析柱的一端進(jìn)去,由于不同生物分子其尺寸、電荷、疏水等物理性能有差異,使得其與層析柱填充的介質(zhì)作用力(或吸附強(qiáng)度)不同,導(dǎo)致不同分子在層析柱保留時(shí)間不同,因此不同組分的分子可以按順序從柱子另外一端流出來以達(dá)到分離的目的。層析分離效果主要取決于其層析柱中的層析介質(zhì)微球。由于層析分離純化技術(shù)牽涉到材料、生物、化學(xué)等交叉技術(shù)領(lǐng)域,因此層析介質(zhì)制備技術(shù)門檻高,用于生物分離的層析介質(zhì)基本依賴進(jìn)口。
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