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將目標(biāo)包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo),將未結(jié)合的生物素洗凈后,加入hrp標(biāo)記和親和素,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒,再次洗滌后加入tmb底物顯色。tmb在-化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。在450nm波長下測(cè)定吸光度(o.d.值),計(jì)算樣品濃度。
重復(fù)性不佳,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒,高cv值
1 樣品不均一 加樣前充分混勻樣品,取樣-移液位置一致;
2 包被板表面遭到破壞 洗板加樣時(shí)盡量小心,避免破壞板的包被表面
3 孔與孔之間的交叉污染 孵育后取下蓋子小心操作,避免孔與孔的污染;封板膜不能重復(fù)使用
4 加樣量不一致 樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒廠家,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴
5 邊緣效應(yīng)(外周孔顯色較中心孔深) 孵育時(shí)盡量100 rpm旋轉(zhuǎn)混勻
6 微量加樣不準(zhǔn)確 -微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性
7 不正確的洗滌 洗液準(zhǔn)確配制;充分洗滌,靜置15秒,確定每一步的洗滌
1、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒公司,防止水分的蒸發(fā)。
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