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含50%甘油和0.05%-l化鈉的pbs(ph 7.4)中的濃度(mg / ml)。 該抗l體
2.蛋白a / g瓊脂糖(目錄號30301):一小瓶– 400 μl 50%漿液。
3. 5x測定/裂解緩沖液(目錄號30302):一瓶– 30 ml的250 mm tris-hcl,ph 8,750mm nacl,50 mm mgcl2,5 mm edta,5%triton x-100。
4.抗arf 6,兔多克l隆抗l體(貨號21032):一小瓶– 100 μl(1 mg / ml)
ph 7.4的pbs中含有50%的甘油。
5. 100 xgtpγs(目錄號30303):1瓶– 100 μl,10 mm,使用5 μlgtpγs標(biāo)記0.5 ml細(xì)胞裂解液。
6. 100 x gdp(產(chǎn)品目錄號30304):一個樣品瓶– 100 μl,100 mm,使用5 μl gdp標(biāo)記0.5 ml細(xì)胞裂解物。
2.蛋白酶抑l制劑
3. 4°c管搖桿或搖床
4. 0.5 m edta,ph8.0
5. 1 m氯-
6. 2倍還原sds-page樣品緩沖液
7.電泳和免l疫印跡系統(tǒng)
8.免l疫印跡洗滌緩沖液,ras(g13d),例如tbst(10 mm tris-hcl,ph 7.4,0.15 m nacl,0.05%
吐溫20)
9.免l疫印跡封閉緩沖液(tbst包含5%脫脂奶粉或3%bsa)
10. pvdf或硝l酸纖維素膜
11.二抗
12. ecl檢測試劑
試劑盒成分
特-識別cdc42活性構(gòu)象的鼠單克l隆抗l體(anti-active cdc42, mouse monoclonalantibody (catalog no. 26905)):小管裝--30ul (抗l體濃度是1mg/ml),抗l體溶于pbs(ph7.4)并包含50%的甘油和0.05%的-l化鈉。此抗l體可以特-識別所有脊椎動物中的cdc42-gtp。
protein a/g agarose (catalog no. 30301) :小管裝—400ul包含200ul protein a/g agarose 和200ul 20%-溶液。(使用時溶液需要充分混勻,再吸取)
5x assay/lysis buffer (catalog no. 30303):小瓶裝—30ml包含250 mm tris-hcl (ph 8.0), 750 mm nacl, 50 mm mgcl2, 5 mm edta, 5% triton x-100。
特-識別cdc42活性構(gòu)象的兔多克l隆抗l體(anti-cdc42, rabbit polyclonal antibody (catalog no.21010)):小管裝--30ul (抗l體濃度是1mg/ml),抗l體溶于pbs(ph 7.4)并包含有 50%的甘油。
100 x gtpγs (catalog no. 30302) :小管裝—100ul (10 mm) ,實驗中0.5ml細(xì)胞裂解液使用 5ul gtpγs標(biāo)記。
100 x gdp (catalog no. 30304) :小管裝—100ul (100 mm) ,實驗中0.5ml細(xì)胞裂解液使用5ul gdp標(biāo)記。
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