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雜交液中的陽(yáng)離子濃度通過(guò)靜電排斥作用影響了雜交體之間的鏈穩(wěn)定性,較高的鹽濃度將增加雜交體的穩(wěn)定性。大于0.4m的na離子濃度,對(duì)tm值、雙鏈復(fù)性速率的影響不大,但隨著na離子濃度的降低,將-影響tm值和雙鏈復(fù)性速率。
-葡聚糖具有很強(qiáng)的水合性,高濃度的-葡聚糖會(huì)使得-分子無(wú)法獲得周邊親水環(huán)境,增加了探針濃度,加快雜交反應(yīng)速率。
原位雜交試驗(yàn)
收集斑馬魚的胚胎,在holfretor水中培養(yǎng),到達(dá)所需要的發(fā)育時(shí)期時(shí),用蛋白酶去除卵膜,用4%-固定,在4℃保存,動(dòng)物組織原位雜交,二十四小時(shí)后用50%甲6醇2%-溶液洗,然后換成甲9醇,在-20c 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧6水處理,去除色素;蛘呤褂-锍脲稀溶液培養(yǎng),可阻斷色素的形成)
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