rac1 kit-武漢紐斯特生物公司

gtpases的rab家族調(diào)節(jié)真核水泡膜運輸。 rab35與兩個血漿

膜和內(nèi)體定位，并涉及到包括t細胞受體回收，卵母細胞卵黃蛋白回收和胞質(zhì)分裂在內(nèi)的各種過程。 rab35調(diào)節(jié)神經(jīng)元樣細胞中的神經(jīng)突生長，并可以-突起。

當前沒有直接測定法來測量rab35 gtpases的活化。

neweast biosciences rab35激l活檢測試劑盒基于特定于配置的單克l隆

特-識別rab35 gtp而不識別rab rab35 gdp的抗l體。鑒于...的高度親和力

抗原的單克l隆抗l體，可以在短時間內(nèi)進行激l活測定。這個

分析提供了-的結(jié)果，并具有一致的可重復(fù)性。

這些抗rab35 gtp單克l隆抗l體也可以用于監(jiān)測大鼠rab35的激l活。

1細胞和組織中的免l疫組織化學(xué)。

neweast biosciences rab35激l活檢測試劑盒提供了一種簡單快速的方法來監(jiān)測

rab35的激l活。每個試劑盒均提供足夠的量以執(zhí)行20個測定。

武漢紐斯特生物科技有限公司（wuhanneweastbiotechonologyco.ltd），系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國neweastbio在的子公司。美國neweastbio-于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，rac1 kit，主要產(chǎn)品有小分子、elisa試劑盒、蛋白等。

懸浮細胞

1.培養(yǎng)細胞并根據(jù)需要用活化劑或抑制l劑-。

2.進行細胞計數(shù)，然后通過離心沉淀細胞。

3.吸出培養(yǎng)基，并用冰冷的pbs洗滌兩次。

4.完全除去pbs洗滌液，然后向細胞沉淀中加入冰冷的1x分析/裂解緩沖液

   （每1 x 107池0.5 – 1 ml）。

5.通過重復(fù)移液裂解細胞。

6.將裂解物轉(zhuǎn)移至適當大小的試管中，并置于冰上。

7.如果發(fā)生核裂解，則細胞裂解液可能變得非常粘稠，難以移液。如果這

   發(fā)生時，裂解液可通過27?號注射l器針頭3-4次以剪切

   基因組dna。

8.通過離心10分鐘（在4°c下為12，000 x g）清除裂解物。

9.收集上清液并將樣品保存在冰上以備立即使用，或速凍并保存在-

   70°c以備將來使用。

陽性和陰性對照的體外gtpγs/ gdp蛋白質(zhì)上樣量

    注意：體內(nèi)-細胞會激l活大約10％的可用rab35，而

    體外gtpγs蛋白負載將激l活近90％的rab35。

1.將0.5 ml每種細胞提取物等分到兩個微量離心管中（或使用1 μg純化的rab35蛋白）。

2.向每個試管中加入20 μl 0.5 m edta（至20 mm終濃度）。

3.將5 μl 100 xgtpγs（至100 μm，終濃度）加到一個試管中（陽性對照）。

4.在第二個試管中加入5 μl 100 x gdp（至1 mm，終濃度）（陰性對照）。

5.在攪拌下將試管在30°c孵育30分鐘。

6.通過將試管放在冰上并添加32.5 μl 1 m mgcl2（至60 mm）。