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原位雜交；原位雜交（in situ hybridization）將標(biāo)記的-探針與細(xì)胞或組織中的-進(jìn)行雜交，稱為原位雜交！

使用dna或者rna探針來檢測與其互補(bǔ)的另一條鏈在-或其他真核細(xì)胞中的位置。

以菌落原位雜交為例：對分散在若干個(gè)瓊脂平板上的少數(shù)菌落（100-200）進(jìn)行克8隆篩選時(shí)，可采用本方法。將這些菌落歸并到一個(gè)瓊脂主平板以及已置于第二個(gè)瓊脂平板表面的一張硝5酸纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時(shí)間后，對菌落進(jìn)行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。

原位雜交是指；分子雜交的一種形式。由未經(jīng)抽-離的染色體dna，在原來位置上被變性成單鏈后，原位雜交，與探針進(jìn)行分子雜交。1977年由本頓(w.d.benton)和戴維斯(r.w.davis)在原分子雜交基礎(chǔ)上發(fā)展的一種較新的分子雜交技術(shù)。方法是將菌落或噬菌斑轉(zhuǎn)移到硝9酸纖維素濾膜上，使在原位發(fā)生溶菌后變性的dna，同濾膜原位結(jié)合，再與有放5射性同位素標(biāo)記的特定核苷酸“探針”雜交，其結(jié)果可用放5射自顯影來顯示，出現(xiàn)銀粒的地方便是待測染色體dna上與探針互補(bǔ)順序所在的位置。對快速檢測轉(zhuǎn)化群落中的dna序列或任何一種插入的dna序列，以及動植物的基因定位工作，都具有廣泛應(yīng)用價(jià)值。(見“分子雜交”、“放5射自顯影”、“影印培養(yǎng)技術(shù)”)

多種探針標(biāo)記檢測系統(tǒng)

基于地高3辛、生物素和熒光標(biāo)記分子的標(biāo)記和檢測系統(tǒng)是常見的原位雜交檢測方法。

熒光標(biāo)記檢測常為直接探針標(biāo)記方法，如在dutp/utp/ddutp上連接fluorescein后進(jìn)行-標(biāo)記。由于標(biāo)記在-上的熒光分子必須經(jīng)受雜交和洗脫過程中的考驗(yàn)，以及熒光分子易于衰減，其檢測靈敏度受到一定的影響。但對熒光分子的直接檢測呈現(xiàn)的背景較低。

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