友名生物技術(shù)-湖北腺---相關(guān)載體

基因?qū)�入�?xì)胞常用方法

轉(zhuǎn)染

　 重組的噬菌體dna也可象質(zhì)粒dna的方式進(jìn)入宿主菌，即宿主菌先經(jīng)過(guò)cacl2，電穿孔等處理成感受態(tài)-再接受dna，進(jìn)入感受態(tài)-的噬菌體dna可以同樣copy和繁殖，這種方式稱為轉(zhuǎn)染（transfection）。m13噬菌體dna導(dǎo)入大腸桿1菌就常用轉(zhuǎn)染的方法。重組dna進(jìn)入宿主細(xì)胞也常用轉(zhuǎn)染方式。zui-的是1973年建立的磷酸鈣法，其利用的基本現(xiàn)象是：dna如以磷酸鈣-dna共沉淀物形式出現(xiàn)時(shí)，腺-相關(guān)載體，培養(yǎng)細(xì)胞攝取dna的效率會(huì)-提高。用電穿孔法處理培養(yǎng)的哺乳類細(xì)胞也能提高細(xì)胞攝取dna能力，但所用外加電場(chǎng)的強(qiáng)度、電脈沖的長(zhǎng)度等條件與處理-者都很不相同。用人工脂質(zhì)膜包裹dna，形成的脂質(zhì)體可以通過(guò)與細(xì)胞膜融合而將dna導(dǎo)入細(xì)胞，方法簡(jiǎn)單而有效，但缺點(diǎn)是有細(xì)胞毒性和血1清的不親和性，近年來(lái)人們發(fā)現(xiàn)了一種更為有效的轉(zhuǎn)染試劑－陽(yáng)離子聚合物，其克服了脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑細(xì)胞毒性大，在體內(nèi)易被血1清清除等缺點(diǎn)，具有轉(zhuǎn)染效率1高，操作簡(jiǎn)單而日益受到重視。