g蛋白活性檢測試劑盒-武漢紐斯特生物公司

 1.抗活性的arl1，小鼠單克l隆抗l體（貨號26924）：一小瓶–溶于ph 7.4的pbs中的22 μl（1mg / ml），含有50％甘油和0.05％-l化鈉。該抗l體特-識別所有脊椎動(dòng)物的arl1-gtp。

2.蛋白a / g瓊脂糖（目錄號30301）：一小瓶– 400 μl 50％漿液。

3. 5x測定/裂解緩沖液（目錄號30302）：一瓶– 30 ml的250 mm tris-hcl，ph 8，750mm nacl，50 mm mgcl2，5 mm edta，5％triton x-100。

4.抗arl1，g蛋白活性檢測試劑盒，小鼠單克l隆抗l體（目錄號26056）：一小瓶– 100 μl（1 mg / ml）

ph 7.4的pbs中含有50％的甘油。

5. 100 xgtpγs（貨號30303）：1瓶– 100 μl，10 mm，使用5 μlgtpγsgtp標(biāo)記的0.5 ml細(xì)胞裂解物。

6. 100 x gdp（產(chǎn)品目錄號30304）：一個(gè)樣品瓶– 100 μl，100 mm，使用5 μl gdp

gdp標(biāo)記的0.5 ml細(xì)胞裂解物。

1.-的和非-的細(xì)胞裂解液

2.蛋白酶抑制l劑

3. 4°c管搖桿或搖床

4. 0.5 m edta，ph8.0

5. 1 m氯-

6. 2倍還原sds-page樣品緩沖液

7.電泳和免l疫印跡系統(tǒng)

8.免l疫印跡洗滌緩沖液，例如tbst（10 mm tris-hcl，ph 7.4，0.15 m nacl，0.05％tween-20）

9.免l疫印跡封閉緩沖液（tbst包含5％脫脂奶粉或3％bsa）

10. pvdf或硝l酸纖維素膜

11.二抗

12. ecl檢測試劑

?1x測定/裂解緩沖液：短暫混合5x儲(chǔ)備液，并在去離子水中稀釋至1x。 在使用前，添加蛋白酶抑制l劑，例如1 mm pmsf，10 μg / ml亮肽素和10 μg / ml抑肽酶。

檢測原理

    武漢紐斯特生物技術(shù)有限公司的cdc42活性檢測試劑盒主要是利用識別蛋白特異形態(tài)的cdc42-gtp單克l隆抗l體特-的去檢測細(xì)胞提取物或者體外的（樣品需要進(jìn)行g(shù)tpγs活化處理）活性cdc42-gtp的水平。簡言之，特-識別cdc42活化構(gòu)象的鼠單克l隆抗l體可以特-結(jié)合細(xì)胞裂解液中的cdc42-gtp活性蛋白，然后利用protein a/g將抗原抗l體的結(jié)合物吸附下來，再利用特-識別cdc42活化構(gòu)象的兔多克l隆抗l體進(jìn)行免l疫印跡分析進(jìn)行檢測。