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直接染色法:(1)將固定好的玻片置于濕盤中,滴加熒光染色液,以覆蓋為度,加蓋, 37°c感做30 min~45min.(2) pbs沖洗3次,每次沖洗3min,即3x3沖洗。(3)蒸餾水沖洗。(4)滴甘油緩沖液一滴,封片,熒光顯微鏡檢查。間接染色法:(1)檢查抗原: 取固定標(biāo)本,加已知的, 37°c孵育30min;以pbs液3x3沖洗;再加熒光標(biāo)記的抗, 37°c孵育30min;pbs 3x3沖洗;h20 沖洗,涼干;加甘油緩沖液,封片、鏡檢。(2)檢查:以后動物的淋巴組織涂片,自然干燥,固定;滴加相應(yīng)抗原液(按1 : 100~1 : 500稀釋), 37°c孵育30min;pbs液3x3沖洗;加熒光, 37c孵育30min;pbs液3x3沖洗;水洗,涼干;加甘油緩沖液,高溫染色罐,封片、鏡檢。
結(jié)果顯示:熒光顯微鏡所觀察到的圖象,染色罐價格,主要以兩個指標(biāo)判斷結(jié)果,一個是形態(tài)學(xué)特征;另一個是熒光的亮度,在結(jié)果的判定中,必須將二者結(jié)合起來,綜合判定。熒光強度的表示方法如下:+十+ ~ ++++:熒光閃亮,呈明顯的亮綠色。++ :熒光明亮,呈黃綠色。+ :熒光較弱,但清楚可見。土:極弱的疑熒光。一:無熒光。
先在可見光源下找到具有細(xì)胞分裂相的視野,然后打開熒光
2.酸性染料:實踐中應(yīng)用酸性染料時往往需要兩只或兩只以上的染料進(jìn)行拼色,而不同酸性染料的染色速率差異較大,有-的競?cè)粳F(xiàn)象,所以選用時參照染料制造廠商的三原色或者在使用前查一下有關(guān)<染料應(yīng)用手冊>,找出配伍相近的染料,然后進(jìn)行先鋒試樣則更為妥當(dāng)。常用的弱酸性染料有:polor,綠g、gn,染色罐供應(yīng), xylene 棕bl,灰p、堅牢藍(lán)pr: carbolan艷綠5g, 5gs,藍(lán)b, purp-le紫2rs以及國產(chǎn)的一些酸性染料, 如酸性紅b(c.i,染色罐,酸性紅151),大紅gr,深藍(lán)5r等應(yīng)用在聚-塑料上也有一定的實用價值。 -是具有蕙醌和-吡酮結(jié)構(gòu)的染料,不僅勻染性好,而且還有較好的日曬和濕處理牢度,雙-結(jié)構(gòu)染料對聚-的覆蓋性尤佳。
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