ecl超敏發(fā)光液supereclplus

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ecl超敏發(fā)光液supereclplus[supereclplusdetectionreagent]
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supereclplusdetectionreagent supereclplus超敏發(fā)光液 045-100ml 435
supereclplusdetectionreagent supereclplus超敏發(fā)光液 045-500ml 1750
supereclplusdetectionreagent supereclplus超敏發(fā)光液 045-1l 3000
產(chǎn)品描述：
ecl超敏發(fā)光液用于檢測(cè)直接或間接標(biāo)記辣根-化物酶hrp的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。由于采用了-的發(fā)光底物系統(tǒng)，supereclplus超敏發(fā)光液是目前靈敏的商業(yè)化熒光ecl檢測(cè)試劑：
（1）具有-靈敏度和高信噪比，可檢測(cè)10～100fg抗原；
（2）可在日光燈下進(jìn)行發(fā)光操作；
（3）發(fā)光迅速，熒光可使x光膠片感光達(dá)12小時(shí)以上，-適用于痕量蛋白或-；
（4）可使用更高的抗體稀釋倍數(shù)(1:2000～1:10000)，極其節(jié)省抗體。
2.用途：用于hrp標(biāo)記抗體的westernblot和hrp標(biāo)記探針的-雜交。
3.使用方法:
（1）執(zhí)行常規(guī)sds-page、轉(zhuǎn)膜和westernblot步驟。注意用hrp標(biāo)記lgg或用一抗-鏈親和素-生物素-hrp夾法。
（2）westernblot-一次洗膜的同時(shí)新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液a和b，放入干凈容器中混合。建議立即使用工作液，室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但靈敏度略有降低。
（3）用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入發(fā)光工作液（0.125ml發(fā)光工作液/cm2膜）中，與發(fā)光工作液充分接觸。室溫孵育3分鐘，準(zhǔn)備立即壓片-。孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)不會(huì)增加靈敏度，有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致-條帶異常。發(fā)光過(guò)程的本質(zhì)是酶促反應(yīng)，使用過(guò)少的發(fā)光工作液不利反應(yīng)進(jìn)行，也會(huì)導(dǎo)致膜上條帶-不均和明顯降低靈敏度。為達(dá)節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。
（4）用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。
（5）打開(kāi)x光膠片暗盒，在暗盒內(nèi)表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將westernblot膜貼在保鮮膜上，將保鮮膜折起來(lái)完全包裹westernblot膜，去除氣泡和皺褶，可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋westernblot膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi)，蛋bai帶面向上。
（6）暗房?jī)?nèi)壓x光膠片，分別-不同的時(shí)間如數(shù)秒到數(shù)分鐘。顯影沖洗。
4.儲(chǔ)存：4℃密封避光保存一年以上。短期可放置室溫。
5.安全性：無(wú)特殊毒性，按普通化學(xué)品處理。
6.ecl超敏發(fā)光液注意事項(xiàng)：
（1）步驟1～5可在日光燈下操作；但發(fā)光液曝露于強(qiáng)光下時(shí)間過(guò)久靈敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。
（2）長(zhǎng)時(shí)間-或蛋白過(guò)量，將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線(xiàn)-。-不足則條帶模糊。
（3）發(fā)光工作液孵育約3分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強(qiáng)條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見(jiàn)，低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見(jiàn)但可使x光膠片-。不能簡(jiǎn)單以肉眼觀察判斷條帶發(fā)光時(shí)間。肉眼不可見(jiàn)的熒光實(shí)際上可持續(xù)數(shù)小時(shí)并使x光膠片感光，因而弱帶可-1-10小時(shí)。如果-后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ecl發(fā)光和-。
（4）由于超敏發(fā)光液極其靈敏，--大多數(shù)進(jìn)口抗體起始濃度為一抗1:1000～1:4000，二抗1:2000～1:5000�？贵w濃度過(guò)高將造成高背景或沒(méi)有條帶，導(dǎo)致失敗。對(duì)于大量蛋白需要將superecl稀釋20-25倍使用。
（5）某些保鮮膜包裹印跡膜時(shí)可能會(huì)淬滅熒光，應(yīng)選擇高保鮮膜。
（6）使用肉眼可見(jiàn)的預(yù)染色蛋白marker和熒光-放射自顯影-標(biāo)簽可-確定膠片上條帶的位置和大小。
（7）nan3能抑制hrp活性，回收第二抗體應(yīng)避免使用nan3，如必需使用勿超過(guò)0.01%。
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