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胱天蛋白酶3試劑盒、casp-3酶免試劑盒說明書

胱天蛋白酶3試劑盒、casp-3酶免試劑盒說明書

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試劑盒名稱  胱天蛋白酶3試劑盒,casp-3酶免試劑盒

胱天蛋白酶3試劑盒,casp-3酶免試劑盒說明書
規(guī)格  48t/96t
品牌  江萊生物
檢測方法  elisa酶聯(lián)免疫法
檢測波長  450nm
樣本 血清、血漿、細(xì)胞上清液等
樣本體積 50~100ul
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué)、-、免疫學(xué)等
使用范圍 僅用于科研實(shí)驗(yàn)
保存 2~8℃,避光保存

胱天蛋白酶3試劑盒,casp-3酶免試劑盒操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl!
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl!
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(6)洗板,同(4)!
(7)每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min!
(9)洗板,同(4)!
(10)每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min!
(11)每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)!
(12)分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差(w1-w2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(s)和陰性對照(n)的 od值后,計算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

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