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植物抗病細胞突變體篩選的一般程序
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分離變體時、植物細胞起始材料的選擇是日常重要的。首先,應(yīng)該用優(yōu)良的、缺點需要改進的基因型;其次,應(yīng)該避免采用不能再生或難以再生的材料;選用染色體數(shù)穩(wěn)定的細胞系。住許多情況下,所用材料的倍性水平也是研究者考慮的一個方面。從理論上講,單倍體材料是較理想的。它不僅對篩選隱性突變體有利,屋頂種菜,而且對顯性突變體的選擇也具有世之,對外、單倍性材料還能通過加倍形成純合二倍體,但其遺傳不穩(wěn)定性影響了它的使用。討下某些性狀的選擇,倍性不平就顯得不重要。對只在細胞水平上表達的遺傳變體表型、若為顯性時,單倍性就沒有什么意義,屋頂種菜方案,至多倍性培養(yǎng)物更為有利,因為它幾手可以通過每個細胞相對基因擴增來提高篩選出突變性狀的機會。此外,在離體條件下 · 比單倍體倍性高的細胞培養(yǎng)物具有的遺傳穩(wěn)定性,因此實際上用這樣的細胞系更為方便。
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目前用于分離突變體的細胞材料有:愈傷組織培養(yǎng)物、細胞培養(yǎng)物、原生質(zhì)體培養(yǎng)物等,屋頂種菜-,它們各有優(yōu)缺點。愈傷組織是分離突變體的簡單的細胞材料,但具有許多不利因素,如培養(yǎng)物相對生長速率較慢;rh于處于表面的少部分細胞材料能夠直接接觸到培養(yǎng)基中的選擇壓力,從而使大部分細胞可能逃避選擇壓力的作用;已死的或?qū)⑺赖慕M織塊中的個別抗性細胞,可能由于周圍生理生化障礙,-丁它分裂產(chǎn)生新細胞團的能力由于交叉飼養(yǎng)作用(crossfe·ding),有可能出現(xiàn)抗性表型的假象;物理或化學(xué)誘變劑的作用同樣也不可能達到均一。因此,屋頂種菜設(shè)計方案,用愈傷組織培養(yǎng)物進行篩選并不是一種適宜的細胞材料。但從育種實踐角度看,采用初的新鮮愈傷組織,與培養(yǎng)周期較長的細胞培養(yǎng)物和原生質(zhì)體培養(yǎng)物相比,也有其-的優(yōu)勢。由于培養(yǎng)周期短,可減少染色體遺傳不穩(wěn)定性及發(fā)生遺傳變異的頻率。對于育種計劃中改良個別不利性狀,保持其他優(yōu)良性狀的篩選是十分有益的、另外,可以減輕或者避免由培養(yǎng)時間延長引起的許多-后果,如喪失分化能力、不形成胚狀體、育性喪失等。
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