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分離抗性突變體一般有如下步驟
(1)在抑制培養(yǎng)基中分離出抗性細(xì)胞系。經(jīng)誘變處理(或供選擇自發(fā)突變)后的細(xì)胞群,通過(guò)一步法或多步法從中分離出能夠存活的或相對(duì)不受抑制影響的抗性細(xì)胞系作為假定的突變體。
(2)消除漏網(wǎng)的-型細(xì)胞。假定的突變體細(xì)胞系,-種植箱,在含抑制生長(zhǎng)濃度選擇劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),咸寧種植箱,轉(zhuǎn)培幾代,以消除可能逃脫選擇劑抑制而漏網(wǎng)的-型細(xì)胞。然后,轉(zhuǎn)到不含選擇劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),轉(zhuǎn)培幾代以消除可能有對(duì)選擇劑上癮的-型細(xì)胞。
(3)在組織培養(yǎng)中表現(xiàn)型的表達(dá)。假定的突變體愈傷組織,在含抑制生長(zhǎng)的不同濃度選擇劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),比較各樣假定的突變體,以發(fā)現(xiàn)是否那些愈傷組織無(wú)性系都有同樣水平的抗性。
(4)從抗性細(xì)胞系到再生植株。在抗性細(xì)胞系失去分化能力和生成再生植株能力之前,盡快使它們?cè)偕鲂≈仓辍?/dv>
(五)突變體的鑒定組織培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的變異稱為體細(xì)胞變異。一般來(lái)說(shuō),體細(xì)胞變異有外遺傳變異、遺傳變異或兩者兼有。外遺傳變異是離體培養(yǎng)過(guò)程中除遺傳變異以外的表型變異的統(tǒng)稱。其機(jī)制目前尚不十分清楚,有人認(rèn)為可能涉及特定條件下基因的選擇表達(dá),不是遺傳物質(zhì)本身改變的結(jié)果。因此,外遺傳變異的基本特征是離開(kāi)選擇壓力后,喪失變-狀。遺傳變異是dna一級(jí)結(jié)構(gòu)上發(fā)生的-的、能夠遺傳的變異,方形種植箱,這種變異不是由于遺傳物質(zhì)的分離或者基因重組引起的,小型種植箱,而是在組織培養(yǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的。
除草一般通過(guò)播種前的地表處理、播前或播后噴施除草劑均可以較好地控制苗期雜草,若在查苗時(shí)發(fā)現(xiàn)雜草仍然較多,對(duì)有間苗、定苗要求的可結(jié)合間苗、定苗人工除草一次;對(duì)無(wú)間苗、定苗作業(yè)的,可以采用主要雜草長(zhǎng)到防除標(biāo)準(zhǔn)時(shí),選擇適合的除草劑除草即可,也可以人工除草。但需注意的是,保護(hù)性耕作地由于地表有大量的秸稈覆蓋,人工用鋤頭除草比傳統(tǒng)地困難。冬小麥通過(guò)播種前后的處理,一般苗期雜草不多,但翌年返青后會(huì)出現(xiàn)較多的雜草,采用化除或人工除草均可。對(duì)于有中耕追肥要求的作物如玉米等,可以在中耕追肥時(shí),結(jié)合培土進(jìn)行除草。實(shí)際上,目前有些地方已不再進(jìn)行中耕培土作業(yè)。同時(shí),由于保護(hù)性耕作地的秸稈覆蓋量大可有效抑制雜草的生長(zhǎng),故不需要進(jìn)行苗期后的除草。所有作物長(zhǎng)到封壟后,均不再進(jìn)行除草。
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