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| 試劑盒名稱 |
enpp5試劑盒,外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶5試劑盒 |
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| 規(guī)格 |
48t/96t |
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| 品牌 |
江萊生物 |
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| 檢測方法 |
elisa酶聯(lián)免疫法 |
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| 檢測波長 |
450nm |
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| 樣本 |
血清、血漿、細(xì)胞上清液等 |
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| 樣本體積 |
50~100ul |
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| 研究領(lǐng)域 |
神經(jīng)生物學(xué)、-、免疫學(xué)等 |
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| 使用范圍 |
僅用于科研實驗 |
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| 保存 |
2~8℃,避光保存 |
enpp5試劑盒,外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶5試劑盒操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl!
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl!
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)!
(7)每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl!
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min!
(9)洗板,同(4)!
(10)每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min!
(11)每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)!
(12)分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差(w1-w2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(s)和陰性對照(n)的 od值后,計算s/n值。s/n***2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
enpp5試劑盒,外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶5試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線計算
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