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微陣列芯片應(yīng)用流程
1)制備靶點(diǎn)
從生物標(biāo)本中提取核苷酸并進(jìn)行標(biāo)記;
(2)雜交
讓靶點(diǎn)與芯片上的cdna或寡核苷酸序列進(jìn)行孵育;
(3)獲取數(shù)據(jù)
掃描與探針雜交的靶點(diǎn)表現(xiàn)出來的信號(hào)強(qiáng)度
(4)數(shù)據(jù)分析
從大量數(shù)據(jù)中得出具有生物學(xué)意義的結(jié)論
微陣列芯片技術(shù)通過測(cè)定能夠與探針雜交的mrna的數(shù)量,海南基因芯片,反映表達(dá)此mrna的基因的轉(zhuǎn)錄情況,芯片的構(gòu)建首先要根據(jù)研究的需要選擇基因及相應(yīng)的探針,其次是從標(biāo)本中提取mrna,基因芯片分析,并制備出靶點(diǎn),然后將靶點(diǎn)加入芯片,進(jìn)行孵育雜交、沖洗掉沒有雜交的樣品以及掃描等操作,什么是基因芯片,得到原始數(shù)據(jù),再將這些數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化和統(tǒng)計(jì)分析后得到結(jié)論,構(gòu)造適當(dāng)?shù)奈㈥嚵行酒情_展后續(xù)研究的基礎(chǔ)。
原位合成法主要為光引導(dǎo)聚合技術(shù),它不僅可用于寡聚核苷酸的合成,也可用于合成寡肽分子。光引導(dǎo)聚合技術(shù)是照相平板印刷技術(shù)( photolithography )與傳統(tǒng)的-、多肽固相合成技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物。半導(dǎo)體技術(shù)中曾使用照相平板技術(shù)法在半導(dǎo)體硅片上制作微型電子線路。固相合成技術(shù)是當(dāng)前多肽、-人工合成中普遍使用的方法,技術(shù)成熟且已實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。二者的結(jié)合為合成高密度-探針及短肽陣列提供了一條快捷的途徑。
基因芯片(又稱 dna 芯片、生物芯片)技術(shù)就是順應(yīng)這一科學(xué)發(fā)展要求的產(chǎn)物,它的出現(xiàn)為解決此類問題提供了光輝的前景。該技術(shù)系指將大量(通常每平方厘米點(diǎn)陣密度高于 400 )探針分子固定于支持物上后與標(biāo)記的樣品分子進(jìn)行雜交,通過檢測(cè)每個(gè)探針分子的雜交信號(hào)強(qiáng)度進(jìn)而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息。通俗地說,就是通過微加工技術(shù) ,基因芯片制備,將數(shù)以萬計(jì)、乃至百萬計(jì)的特定序列的dn-段(基因探針),有規(guī)律地排列固定于2cm2 的硅片、玻片 等支持物上,構(gòu)成的一個(gè)二維dna探針陣列,與計(jì)算機(jī)的電子芯片十分相似,所以被稱為基因芯片。基因芯片主要用于-工作 。
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