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pcr反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的dna拷貝數(shù)是呈指數(shù)方式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終pcr反應(yīng)不再以指數(shù)方式生成模板，pcr儀，從而進(jìn)入平臺(tái)期。在傳統(tǒng)的pcr 中，常用凝膠電泳分離并用熒光染色來(lái)檢測(cè)pcr反應(yīng)的終擴(kuò)增產(chǎn)物，因此用此終點(diǎn)法對(duì)pcr產(chǎn)物定量存在不-之處。在real-time q-pcr中，對(duì)整個(gè)pcr反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)和連續(xù)地分析擴(kuò)增相關(guān)的熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)時(shí)間的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)的變化可以繪制成一條曲線。

三磷酸脫氧核苷酸(dntp)dntp的與濃度和pcr擴(kuò)增效率有密切關(guān)系。在pcr反應(yīng)中，dntp應(yīng)為50-200μmol/l，pcr檢測(cè)儀，尤其是注意4種dntp的濃度要相等(等摩爾配制)，pcr擴(kuò)增儀，濃度過(guò)低又會(huì)降低pcr產(chǎn)物的產(chǎn)量。5. 鎂離子濃度mg2+能與dntp結(jié)合，mg2+對(duì)pcr擴(kuò)增的特-和產(chǎn)量有-的影響。在一般的pcr反應(yīng)中，各種dntp濃度為20μmol/l時(shí)，mg2+濃度為1.5~2.0mmol/l為宜，mg2+濃度過(guò)高，反應(yīng)特-降低，出現(xiàn)非特異擴(kuò)增：濃度過(guò)低，會(huì)降低taqdna聚合酶的活性，使反應(yīng)產(chǎn)物減少。

靈敏度、準(zhǔn)確性等指標(biāo)

pcr儀的檢測(cè)靈敏度指能檢測(cè)到的量。一款好的熒光定量pcr儀是可以達(dá)到單拷貝檢測(cè)靈敏度的。

準(zhǔn)確性是指測(cè)量結(jié)果能夠準(zhǔn)確反應(yīng)目標(biāo)基因的量，熒光pcr儀，并且重復(fù)多次實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蜻_(dá)到一致結(jié)果。你可以對(duì)比多款pcr儀，選取準(zhǔn)確性相對(duì)較高的儀器。

溫度控制功能

早期pcr儀的溫控方式是模塊控溫，現(xiàn)在普遍應(yīng)用的是計(jì)算控溫（也稱(chēng)管式控溫）了。一些pcr儀可以實(shí)現(xiàn)溫度梯度功能，即不同列或不同行之間可以實(shí)現(xiàn)不同溫度。梯度溫度對(duì)于基因擴(kuò)增研究來(lái)說(shuō)是非常有用的功能。

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