多抗制備佐劑-蘇州博特龍公司

雜交瘤細(xì)胞的篩選與克0隆

細(xì)胞融合后，培養(yǎng)于添加了 hat 的選擇培養(yǎng)基的 96 孔板中，培養(yǎng)-后半定量換液，培養(yǎng)基更換時應(yīng)注意輕緩，第 5 天能在顯微鏡下看到明顯的雜交瘤細(xì)胞克0隆，第 7 天左右，雜交瘤細(xì)胞能長至鋪滿孔底約 1 /10。此時進(jìn)行 elisa 檢測養(yǎng)心細(xì)胞孔。取細(xì)胞培養(yǎng)上清對 mrj 融合蛋白進(jìn)行間接 elisa檢測，篩選出能分泌抗0體的雜交瘤細(xì)胞孔，有限稀釋法對陽性孔進(jìn)行亞克0隆，經(jīng)過 3 次亞克0隆后，獲得了能夠穩(wěn)定 分 泌 抗 mrj 融合蛋白單克0隆抗0體的細(xì)胞株。對雜交瘤細(xì)胞株按從 96 孔板-24 孔板-10 cm 培養(yǎng)皿的順序擴(kuò)大培養(yǎng)，部分細(xì)胞用于腹0水制備單抗，部分細(xì)胞凍存?zhèn)溆谩?br />

通過后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠（視頻），每只小鼠注射100μl。

備注：本佐劑與抗原混合后產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象，抽入針管前應(yīng)充分混勻，抽入針管后應(yīng)盡快注射。

第21天按同樣方式加強(qiáng)免0疫1針。

備注：每次佐劑和抗原現(xiàn)配現(xiàn)用。

第35天采微量尾血進(jìn)行elisa測定，抗0體滴度應(yīng)在1:10000-1:10000000范圍內(nèi)，隨后即可采全血或按常規(guī)方法進(jìn)行抗原沖擊免0疫和脾細(xì)胞融合。