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蘇州博特龍免疫技術(shù)有限公司提供8周標準兔多抗制備佐劑-博特龍技術(shù)有限公司。

1. 第21天按同樣方式加強免0疫1針。備注：每次佐劑和抗原現(xiàn)配現(xiàn)用。

2. 第35天采微量血進行elisa測定，抗0體滴度應(yīng)在1:10000-1:10000000范圍內(nèi)，隨后即可采全血或按常規(guī)方法進行抗原沖擊免0疫和脾細胞融合。

3. 若抗0體滴度沒有達到要求，可在第42天按同樣方式加強免0疫1針。備注：通常情況下小鼠只需免0疫2針，而家兔往往需要免0疫3針。

4. 若免0疫3針，8周標準兔多抗制備佐劑，可在第52-56天采微量血進行elisa測定，抗0體滴度應(yīng)在1:10000-1:1000000范圍內(nèi)，隨后即可采全血或按常規(guī)方法進行抗原沖擊免0疫和脾細胞融合。備注：佐劑免0疫效果有時也與抗原特性有關(guān)，若免0疫3針后仍達不到要求，不建議進行更多針次免0疫。

quickantibody-mouse5w （5周標準鼠單抗/多抗制備佐劑）

quickantibody-mouse5w用途

通過5周2針的標準免0疫程序制備小鼠單克0隆和多克0隆抗0體，elisa滴度（cutoff值為0.1000）可達到1:10000-1:10000000。

quickantibody-mouse5w使用方法（詳見使用說明書）

1. 用生理鹽水將抗原稀釋到2倍zui終濃度（按每針次50μl用量配制）。

備注：使用的抗原用量為

（1）免0疫原性較強的滅活全-或全-以及-樣顆�？乖酷槾�1-5μg；

（2）免0疫原性較弱的亞單位蛋白抗原每針次5-20μg；

（3）偶聯(lián)了載體蛋白的小分子抗原每針次20-50μg。

2. 充分混勻佐劑，無菌條件下取出所需用量（按每針次50μl）與抗原按體積比1:1迅速混勻。

備注：本佐劑產(chǎn)生沉淀屬正常現(xiàn)象，與抗原混合操作越快越好。

材料與方法

一、材料

afp購自上海領(lǐng)潮公司。sp2／0骨0髓瘤細胞(中科院上海細胞庫)。8～12周齡balb／c小鼠(第四軍0醫(yī)大學實驗動物中心)。spf級。

二、方法

1．動物免0疫：將4只8～12周齡balb／c小鼠隨機分為兩組，每組2只，分別命名為1號和2號(第yi組)、3號和4號(第二組)。第yi組按常規(guī)免0疫方法進行免0疫一…，第二組采用改良的免0疫方法進行免0疫。免0疫前靜脈采集少量-，析出血0清作為后續(xù)檢測的陰性對照血0清。

第yi組：afp50ug(50肚1)與等量福氏完全佐劑(sigma，美國)混合，充分乳化后注入8～12周齡balb／c小鼠腹腔，2周后用同量抗原加不完全福氏佐劑(sigma，美國)腹腔注射，4周后用同量抗原加不完全福氏佐劑腹腔注射，融合前3 d作腹腔注射加強免0疫。

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