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當(dāng)一束頻率為v0的單色光照射到樣品上后,分子可以使入射光發(fā)生散射。大部分光只是改變光的傳播方向,從而發(fā)生散射,而穿過分子的透射光的頻率,仍與入射光的頻率相同,這時,稱這種散射稱為瑞利散射;還有一種散射光,它約占總散射光強(qiáng)度的 10^-6~10^-10,快速激光拉曼公司,該散射光不僅傳播方向發(fā)生了改變,而且該散射光的頻率也發(fā)生了改變,邢臺激光拉曼公司,從而不同于激發(fā)光(入射光)的頻率,bruker激光拉曼公司,因此稱該散射光為拉曼散射。在拉曼散射中,散射光頻率相對入射光頻率減少的,稱之為斯托克斯散射,因此相反的情況,頻率增加的散射,稱為反斯托克斯散射,斯托克斯散射通常要比反斯托克斯散射強(qiáng)得多,拉曼光譜儀通常大多測定的是斯托克斯散射,也統(tǒng)稱為拉曼散射。散射光與入射光之間的頻率差v稱為拉曼位移,拉曼位移與入射光頻率無關(guān),它只與散射分子本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)。拉曼散射是由于分子極化率的改變而產(chǎn)生的(電子云發(fā)生變化)。拉曼位移取決于分子振動能級的變化,不同化學(xué)鍵或基團(tuán)有特征的分子振動,δe反映了特定能級的變化,因此與之對應(yīng)的拉曼位移也是特征的。這是拉曼光譜可以作為分子結(jié)構(gòu)定性分析的依據(jù)。
1.拉曼效應(yīng) 光照射到物質(zhì)上發(fā)生彈性散射和非彈性散射. 彈性散射的散射光是與激發(fā)光波長相同的成分.非彈性散射的散射光有比激發(fā)光波長長的和短的成分, 統(tǒng)稱為拉曼。通俗一點說就是一束光照到某個物體上,會反射與原波長相同和不同的兩種光,相同的叫瑞利散射,不同的就叫拉曼散射。拉曼散射又分為兩種,一種波長比原來的小叫斯托克斯拉曼,還有一種比原來的波長大叫反斯托克斯線。
拉曼光譜是研究生物大分子的有力手段,由于水的拉曼光譜很弱、譜圖又很簡單,故拉曼光譜可以在接近自然狀態(tài)、活性狀態(tài)下來研究生物大分子的結(jié)構(gòu)及其變化。
生物大分子的拉曼光譜可以同時得到許多-的信息:
(1)蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu):α-螺旋、β-折疊、無規(guī)卷曲及β-回轉(zhuǎn)
(2)蛋白質(zhì)主鏈構(gòu)像:-ⅰ、ⅲ,c-c、c-n伸縮振動
(3)蛋白質(zhì)側(cè)鏈構(gòu)像:-氨酸、酪氨酸、色氨酸的側(cè)鏈和后二者的構(gòu)像及存在形式隨其微環(huán)境的變化
(4)對構(gòu)像變化敏感的羧基、巰基、s-s、c-s構(gòu)像變化
(5)生物膜的脂肪酸碳?xì)滏溞D(zhuǎn)異構(gòu)現(xiàn)象。
(6)dna分子結(jié)構(gòu)以及和dna與其他分子間的作用。
(7)研究脂類和生物膜的相互作用、結(jié)構(gòu)、組分等。
(8)對生物膜中蛋白質(zhì)與脂質(zhì)相互作用提供重要信息。
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