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一種晶格狀三維細(xì)胞培養(yǎng)支架及其制作方法和一種應(yīng)用方法。細(xì)胞培養(yǎng)支架包括微孔石英光學(xué)模板,它由有膜層石英光學(xué)模板制成,微孔為斜柱子陣列。制作方法步驟包括:在制作有膜層石英光學(xué)模板后再制作斜柱子陣列微孔,然后去掉高分子材料膜層。應(yīng)用方法步驟包括:三維細(xì)胞培養(yǎng)支架高溫滅菌、表面修飾、細(xì)胞植入和培養(yǎng)、細(xì)胞固定和細(xì)胞透化及封閉、細(xì)胞孵化和細(xì)胞清洗。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)是:能調(diào)整三維細(xì)胞培養(yǎng)支架的孔徑大小、分布以及晶格的層數(shù),生物支架3d,能有效的為組織工程研究提供更為科學(xué)和完整的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、提高細(xì)胞培養(yǎng)的效率、減少動物實(shí)驗(yàn)的次數(shù);同時,三維細(xì)胞培養(yǎng)支架能大批量生產(chǎn),生物,且成本低,能適應(yīng)再生醫(yī)學(xué)的廣泛需求。
三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是一種利用支架材料將體外細(xì)胞進(jìn)行三維空間培養(yǎng)的技術(shù),具有體內(nèi)微環(huán)境模擬度高于二維平面細(xì)胞培養(yǎng)模式,可控性強(qiáng)于動物實(shí)驗(yàn)等優(yōu)點(diǎn).近年來,可降解生物支架,隨著組織工程學(xué)技術(shù)的發(fā)展,各種生物學(xué)材料支架應(yīng)運(yùn)而生,為三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)提供了有利的平臺.在方面,三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已應(yīng)用于角1膜、視網(wǎng)1膜、視覺系統(tǒng)發(fā)育及多種眼腫1瘤等方面的研究中.
人1骨膜來源成骨細(xì)胞與pla(聚乳酸)三維生物支架在體外構(gòu)建骨組織工程骨的生物活性及超微結(jié)構(gòu)特征。 方法: 以小腿截肢-脛骨骨膜組織為原材料,采用組織塊法分離培養(yǎng)骨膜細(xì)胞,置于含10%胎牛血1清的dmem/f12完全培養(yǎng)基中培養(yǎng),將傳代培養(yǎng)至第三代的骨膜細(xì)胞改用成骨-培養(yǎng)基進(jìn)行成骨分化-培養(yǎng),收集-后傳代至第二代的鋪滿細(xì)胞瓶約80%的骨膜來源成骨細(xì)胞作為種子細(xì)胞。
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