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分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于-,蛋白定量以及-生長(zhǎng)濃度的定量。儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器、信號(hào)處理器和顯示與存儲(chǔ)系統(tǒng)組成。
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光源透過測(cè)試的樣品后,部分光源被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
光度計(jì)具有定量測(cè)量、波長(zhǎng)掃描、時(shí)間掃描、多波長(zhǎng)測(cè)試-功能,具有-、高分辨率、低噪聲、低雜散光的特點(diǎn)。具有記憶功能,能在再次開機(jī)時(shí)恢復(fù)測(cè)試狀態(tài),并記憶已測(cè)試的相關(guān)數(shù)據(jù)、圖譜曲線。紫外分光光度計(jì)的原理:物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。分光光度計(jì)的注意事項(xiàng):在儀器尚未接通電源時(shí),電表指針必須于“0”刻線上,若不是這種情況,則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié)。
-的定量
-的定量是分光光度計(jì)使用頻率的功能?梢远咳苡诰彌_液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈dna,光度計(jì)價(jià)錢,以及rna。-的吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。每種-的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的-,事先要選擇對(duì)應(yīng)的系數(shù)。如:1od 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsdna,37μg/ml的ssdna,40μg/ml的rna,30μg/ml的olig。測(cè)試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測(cè)試前,光度計(jì)價(jià)位,選擇正確的程序,光度-產(chǎn)廠家,輸入原液和稀釋液的體積,銅陵光度計(jì),爾后測(cè)試空白液和樣品液。然而,實(shí)驗(yàn)并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗(yàn)者z的問題。靈敏度越高的儀器,表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
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