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1、 操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞-。使用不含熱原和內(nèi)-的試管。收集-后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿:edta、檸檬酸鹽、-血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒報(bào)價(jià),避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并-樣品均勻地充分解凍。
此ibl試劑盒能用于小鼠清,edta血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)。
酶聯(lián)吸附試驗(yàn)(enzymelinkedimmunosorbentassay,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒廠家,elisa)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。它是應(yīng)用比較多的一種酶技術(shù)。elisa試劑盒(elisakits)已成為-和植物病理學(xué)研究中的常用診斷工具,是檢測(cè)組織提取液和細(xì)胞培養(yǎng)液中目標(biāo)抗體/抗原的理想工具,也是重要的控制手段。
1.包被:用0.05mph9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)-白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的tmb底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2m-0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,玉米赤霉烯酮elisa試劑盒,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)od值:在elisa檢測(cè)儀上,于450nm(若以abts顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔o(hù)d值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照od值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
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